Caracterización clínica y molecular de bacteriemias causadas por enterobacterias productoras de β -lactamasas de espectro extendido: 2004-2007 / Clinical and molecular characterization of ESBL-producing enterobacteria isolated from bacteremia in a university hospital

Introduction: Extended-spectrum-β-lactamases (ESBL) are plasmid-encoded enzymes that confer resistance to multiple antimicrobials. ESBL-producing enterobacteria that cause bacteremia limit therapeutic options and increase mortality. Objective: To perform a clinical and molecular description of bacteremia caused by ESBL-producing enterobacteria. Method: We retrospectively studied the cases of bacteremia due to ESBL-producing Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae and Proteus spp in adults admitted to a university hospital during the years 2004-2007. We reviewed the clinical records and antimicrobial susceptibility patterns. Molecular typing was performed by polymerase chain reaction and study of clonality by pulsed-field electrophoresis. Results: We found a prevalence of 9.8 percent ESBL in enterobacteria causing bacteremia. Decreased susceptibility to quinolones and aminoglycosides was observed, without resistance to carbapenems. The predominant ESBL types were CTX-M (96 percent), TEM (62 percent) and GES (28 percent). 79 percent of the strains presented more than one type of ESBL. Clinical analysis revealed high prevalence of risk factors, previous use of antimicrobials and of invasive devices. There was no significant clonality. Conclusion: The presence of ESBLs in bloodstream infections is a clinical problem that must be considered when choosing empiric therapy.

Introducción: β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas plasmidiales que confieren resistencia a múltiples antimicrobianos. Las bacteriemias por enterobacterias productoras de BLEE restringen las opciones terapéuticas y aumentan la mortalidad. Objetivo: Realizar una descripción clínica y molecular de las bacteriemias causadas por enterobacterias productoras de BLEE. Método: Se estudiaron retrospectivamente los casos de bacteriemia por Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae y Proteus spp. confirmadas para BLEE, en adultos ingresados en un hospital universitario durante los años 2004-2007. Se revisaron los registros clínicos y de susceptibilidad. Se realizó tipificación molecular por reacción de polimerasa en cadena y estudio de clonalidad por electroforesis de campo pulsado. Resultados: Se identificó una prevalencia de BLEE de 9,8 por ciento en enterobacterias causantes de bacteriemias. Se observó susceptibilidad disminuida a quinolonas y aminoglucósidos, sin resistencia a carbapenémicos. Los tipos de BLEE predominantes fueron CTX-M (96 por ciento), TEM (62 por ciento) y GES (28 por ciento). El 79 por ciento de las cepas presentó más de un tipo de BLEE. El análisis clínico reveló alta frecuencia de patologías de riesgo, uso previo de antimicrobianos y uso de dispositivos invasores. No se encontró clonalidad significativa. Conclusión: La presencia de BLEE en bacteriemias constituye un problema clínico que debe ser considerado al elegir la terapia empírica.

Diagnóstico de la infección por Treponema pallidum en pacientes con sífilis temprana y neurosífilis mediante reacción de la polimerasa en cadena / Laboratory diagnosis of Treponema pallidum infection in patients with early syphilis and neurosyphilis through a PCR-based test

Syphilis is a sexually transmitted disease caused by Treponema pallidum. The diagnosis is based mainly in clinical presentation and non-specific assays. PCR-based diagnosis has been suggested as an attractive alternative method. The aim of this study was the validation of a PCR-based test for the diagnosis of early syphilis (ES) and neurosyphilis (NS). Clinical samples of mucocutaneous lesions and cerebrospinal fluid (CSF) specimens from patients previously diagnosed for ES and NS respectively using an enlarged gold standard, were tested by PCR. The reaction was done using primers targeting the tpN47gene. Twenty out of 21 mucocutaneous samples from patients diagnosed with ES were positive by PCR, with a clinical sensitivity of 95 percent. Four out of 8 CSF samples from patients previously diagnosed with NS were positive by PCR, with a clinical sensitivity of 50 percent. The clinical specificity for both ES and NS was 100 percent. The PCR sensitivity and specificity for mucocutaneous samples allowed us to implement this assay in our laboratory for routine diagnosis. Although the sensitivity of the PCR in CSF was low, it may be useful to support clinical diagnosis.

La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual producida por Treponema pallidum, cuyo diagnóstico se realiza presuntivamente basándose en aspectos clínicos y análisis de especificidad limitada. La reacción de la polimerasa en cadena (RPC) ha sido planteada como una alternativa diagnóstica de mayor sensibilidad y especificidad. El objetivo de este trabajo fue validar una RPC para el diagnóstico de sífilis temprana (ST) y neurosífilis (NS). Se utilizaron muestras de lesiones muco-cutáneas y de LCR de pacientes con sospecha de cursar ST y NS respectivamente, previamente diagnosticados, utilizando un estándar de oro ampliado. La RPC fue realizada con partidores dirigidos al gen tpN47. De las 21 muestras de pacientes con ST, la RPC resultó positiva en 20, lo que resulta en una sensibilidad clínica de 95 por ciento. De las 8 muestras de pacientes con NS, la RPC resultó positiva en 4, obteniéndose una sensibilidad clínica de 50 por ciento. La especificidad clínica para ST y NS fue de 100 por ciento. La excelente sensibilidad y especificidad de la RPC para muestras muco-cutáneas permitió la exitosa implementación de este análisis en nuestro laboratorio para el diagnóstico de rutina. Si bien la sensibilidad de la RPC en LCR es baja, es muy útil para apoyar el diagnóstico clínico.

Perfil epidemiológico de la candidiasis invasora en unidades de pacientes críticos en un hospital universitario / Epidemiologial profile of invasive candidiasis in intensive care units at a university hospital

Invasive candidiasis (IC) epidemiology has changed in critically ill patients and limited data are available in Chile. Objective: To describe the epidemiological and microbiological profile of IC in critically ill patients. Methods: Observational prospective study conducted from October 2001 to August 2003 in critically ill adults with suspected or confirmed IC. Results: 53 patients met criteria for IC, finding 18 (33.9 percent) candidemias, 22 (41.5 percent) disseminated IC, and 13 (24.5 percent) local IC. We identified 8 (44.4 percent) C. albicans and 10 (55.6 percent) non-albicans Candida in candidemias. C. tropicalis was the predominant non-albicans species (27.7 percent). An 88.8 percent of Candidas sp recovered in candidemias were fluconazole susceptible. Overall hospital mortality was 24.5 percent. Mortality in candidemia was significantly lower than in disseminated IC (16.6 vs 31.8 percent, p = 0.02). Conclusions: A higher proportion of non-albicans Candida was observed in candidemias from critically ill patients. However, most of these strains were fluconazole susceptible. A lower overall mortality was observed in candidemias.

La epidemiología de candidiasis invasora (CI) ha cambiado, lo cual no ha sido suficientemente estudiado en Chile. Objetivo: Describir el perfil epidemiológico y microbiológico de CI en pacientes críticos. Métodos: Estudio observacional prospectivo entre octubre 2001 y agosto 2003, en pacientes críticos adultos con sospecha o confimnación de CI. Resultados: 53 pacientes cumplieron criterios de CI. De ellos, 18 (33,9 por ciento) tuvieron candidemia, 22(41,5 por ciento) CI diseminada y 13(24,5 por ciento) CI local. Entre las candidemias, hubo 8 C. albicans (44,4 por ciento) y 10 Candida no albicans (55,6 por ciento), predominando C. tropicalis (27,7 por ciento). Un 88,8 por ciento de las candidemias fueron susceptibles a fluconazol. La mortalidad hospitalaria global fue 24,5 por ciento, significativamente menor en pacientes con candidemias vs CI diseminada (16,6 vs 31,8 por ciento, p = 0,02). Conclusiones: Se observó una mayor proporción de Candida no albicans en candidemias de pacientes críticos. Sin embargo, la mayoría de estas cepas fue susceptible a fluconazol. La mortalidad global fue menor en candidemias.

Susceptibilidad antimicrobiana de Campylobacter jejuni aislado de coprocultivos en Santiago de Chile / Antimicrobial susceptibility of Campylobacter jejuni isolates from stool cultures in Santiago, Chile

Campylobacter jejuni is a common agent of enterocolitis in humans. Campy lobacteriosis has been recognized as a zoonotic disease whose reservoir is the intestinal flora of poultry. The reposition of fluid and electrolytes is the recommended treatment, and antimicrobials are required only in severe and/or in prolonged disease. Given the emergence of resistance to drugs commonly used in the treatment of acute diarrhea, we studied the antimicrobial susceptibility of 73 strains oí Campylobacter jejuni isolated from stool culture. The antimicrobials tested were: erythromycin, azithromycin, ampicillin and ciprofloxacin. Of the 73 strains tested by E-test, 32.4 percent were resistant to ciprofloxacin and 6.4 percent were resistant to ampicillin. Resistance to erythromycin and azithromycin was not detected. The surveillance of antimicrobial resistance of Campylobacter jejuni is important in the evaluation of empirically used antimicrobials in the treatment of bacterial enterocolitis.

Evaluación de la tinción de Hucker para la búsqueda rutinaria de Campylobacter sp en el estudio de un síndrome diarreico agudo / Evaluation of Hucker stain as Campylobacter sp screening detection during an acute diarrhea disease

La infección por Campylobacter sp es una de las etiologías más comunes de gastroenteritis en el mundo, y en Chile ocuparía el tercer lugar entre las diarreas bacterianas en lactantes, según estudios previos. En nuestro país el cultivo no se realiza rutinariamente por su alto costo económico, siendo conocido que la tinción de Hucker puede ser una buena alternativa de pesquisa. El objetivo del estudio fue conocer la utilidad de la tinción de Hucker y estimar la frecuencia de Campylobacter sp en muestras de deposiciones. Se estudiaron 5.750 muestras de coprocultivos recibidas en el Labo-ratorio de Microbiología de la Red de Salud UC entre marzo del 2002 y mayo del 2004, en las cuales se realizó coprocultivo convencional y tinción de Hucker. Para la validación de la tinción de Hucker con el cultivo se sembró durante un mes todas las muestras para la búsqueda de Campylobacter sp, encontrando una sensibilidad de 37,5% y especificidad de 100%. En 115/5.750 muestras (2%) se observaron bacilos curvos sugerentes de Campylobacter sp por tinción de Hucker y se aislaron otros 233 entero patógenos (4%) que correspondieron a: Salmonella sp (151), Shigella sp (55), Escherichia coli enterohemorrágica (25) y Yersinia sp (2). De las tinciones de Hucker positivas 62,6% correspondieron a niños bajo 5 años y de éstas 63,8% a lactantes. Concluimos que la tinción de Hucker en un método sencillo y específico, aunque poco sensible, que permite aumentar el rendimiento de la detección microbiológica de patógenos entéricos en 33%. En este estudio, Campylobacter sp ocupó el segundo lugar después de Salmonella sp en muestras de deposiciones enviadas para cultivo, concentrándose en edades tempranas de la vida. La búsqueda activa de Campylobacter sp por medio del cultivo específico es fundamental para el diagnóstico etiológico de un síndrome diarreico agudo.

Evaluación del rendimiento del coprocultivo en pacientes hospitalizados / Utility of stool culture in inpatient

Estudios han mostrado que es inapropiado realizar coprocultivos (CP) en pacientes con más de tres días de hospitalización, dado que la causa de diarrea no es atribuible a los patógenos entéricos que habitualmente se buscan en este examen1-3. El objetivo de este trabajo es analizar el rendimiento de los CP realizados en pacientes hospitalizados en la Red de Salud UC desde enero a diciembre del 2002 y la proporción de resultados positivos obtenidos según los días de hospitalización, para así poder definir si las normas internacionales se adaptan a la realidad nacional. Se recibieron 3474 CP, de los cuales 458 (13,2%) provenían de pacientes hospitalizados. De éstos, 16 (3,5%) fueron positivos, 13 se tomaron el día del ingreso, 2 al segundo día y 1 al quinto día de hospitalización. El rendimiento de CP realizados en pacientes con más de dos días de hospitalización fue sólo de 0,5% (1/190). Los resultados encontrados reafirman la recomendación internacional de no solicitar CP en pacientes con más de tres días de hospitalización; e incluso, a la luz de los datos anteriores, se podría sugerir instaurar un punto de corte a los 2 días de hospitalización, ya que más allá de este tiempo no hay un impacto clínico significativo y podríamos ahorrar un 41% de estos exámenes, con los costos correspondientes.